Este kit emplea un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas en fase sólida (ELISA) que utiliza una técnica sándwich de doble anticuerpo para cuantificar las proteínas residuales de la célula huésped (HCP) originadas a partir de la línea celular CHO-K1.
Se empleó un anticuerpo policlonal de oveja específico para CHO-K1 HCP en el ensayo para capturar cualquier HCP restante en las muestras. Los estándares de calibración o las muestras de prueba, junto con el anticuerpo HCP anti-CHO-K1 marcado con HRP, se agregaron simultáneamente a la placa de microtitulación pre-recubierta con el anticuerpo de captura purificado por afinidad, y seguido de incubación y lavado. Se añadió sustrato de TMB (3,3 ',5,5'-tetrametilbencidina) a la reacción, catalizado por la oxidación de HRP para producir un producto de color azul (máximo pico de absorción a 655 nm). A continuación, se añadió la solución de parada para terminar la reacción enzimática, dando como resultado un producto de color amarillo (máximo pico de absorción a 450 nm). Los valores de absorbancia a 450 nm de longitud de onda se correlacionaron positivamente con la concentración de HCP en el estándar de calibración y las muestras. La concentración de HCP en las muestras se puede calcular usando una curva dosis-respuesta.
| Componentes | Condición de envío | Tamaño de la unidad | Método de detección |
| Anti-CHO-K1 tiras de microtitulación HCP | 2-8 ℃ | 96 pruebas | Sándwich ELISA |
| CHO-K1 estándar de calibración HCP | |||
| Solución de reconstitución | |||
| Diluyente | |||
| Concentrado de tampón de lavado (10 ×) | |||
| Anti-CHO-K1 HCP:HRP (100 ×) | |||
| Sustrato TMB | |||
| Detener la solución | |||
| Película de sellado |
| Linealidad y rango | 3-300 ng/mL, R2> 0.990 | ||
| Exactitud | Tasa de recuperación = 94.2%-122.6% | ||
| LLOQ | 3 ng/mL | ||
| ULOQ | 300 ng/ml | ||
| Precisión | 2.6%-6.1% (CV≤ 20%) | ||
| Cobertura de anticuerpos (IMBS-LC-MS) | 94.6% | ||
| Especificidad | Sin reactividad cruzada con Sf9, HEK293T, E.coli BL21, P.pastoris HCP. | ||
| Robustez | Incubar a 25 ± 5 ℃, CV≤ 20% | ||
| La idoneidad del instrumento no se limita a MD Spectra Max ABS y Thermo Multiskan FC | |||
SHENTEK®Kit de preparación de muestras de ADN de células huésped residual
SHENTEK®Kit de cuantificación de ADN de CHO residual (2G)
SHENTEK®Kit ELISA CHO HCP (ELISA en un solo paso)
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