P.pastoris HCP ELISA Kit (ELISA de un solo paso)

Este kit se basa en el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas en fase sólida (ELISA) con una técnica sándwich de doble anticuerpo para detectar proteínas residuales de células huésped (HCP) de células de P.pastoris. En el ensayo se empleó un anticuerpo policlonal de oveja específico para P.pastoris HCP para capturar cualquier HCP restante en la muestra. La cobertura de anticuerpos se evalúa mediante el método actual de la corriente principal. Tanto el estándar de calibración (o muestra de prueba) como la HRP (peroxidasa de rábano picante) marcados con anti-P.pastoris anticuerpo HCP se añadieron simultáneamente a la placa de microtitulación recubierta con el anticuerpo de captura purificado por afinidad. y seguido de incubación y lavado. A continuación, se añadió sustrato de TMB (3,3 ',5,5'-tetrametilbencidina) en la reacción, HRP catalizó la oxidación de TMB por H2O2 para producir un producto de color azul (máximo pico de absorción a 655 nm). A continuación, se añadió la solución de parada para terminar la reacción enzimática, dando como resultado un producto de color amarillo (máximo pico de absorción a 450 nm). Los valores de absorbancia a 450 nm de longitud de onda se correlacionaron positivamente con la concentración de HCP EN EL Estándar de Calibración y las muestras. La concentración de HCP en las muestras se puede calcular usando una curva dosis-respuesta.