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Kit ELISA de tripsina analógica

Número de producto: 1402424

Este kit está diseñado para determinar la presencia de Trypsina-análogo en los procesos de preparación de productos biológicos, capaz de identificar enzimas residuales como TrypLE™De Thermo Fisher Scientific, tripsina recombinante de Sartorius y HyrTryp™Desde Cytiva.

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Kit ELISA de tripsina analógica
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Descripción general-SHENTEK® Kit ELISA analógico de tripsina

El análogo de tripsina es una enzima fúngica recombinante de alta pureza de origen no animal que se obtiene de la producción de fermentación de Fusarium oxysporum DSM2672. El análogo de tripsina escinde los péptidos en el lado C-terminal de los residuos de lisina y arginina como lo hacen las soluciones estándar de tripsina, que se pueden utilizar para disociar una variedad de células adherentes, incluyendo pero no limitado a HEK293, A549, queratinocitos epidérmicos humanos normales (NHEK) y células madre embrionarias (ESC).


Este kit se basa en el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas en fase sólida (ELISA) con una técnica sándwich de doble anticuerpo para detectar el análogo de tripsina residual en las muestras. Se empleó un anticuerpo policlonal de oveja específico para el análogo de tripsina en el ensayo para capturar cualquier análogo de tripsina restante en las muestras. Tanto el estándar de calibración (o muestra de prueba) como el anticuerpo análogo anti-tripsina marcado con HRP (peroxidasa de rábano picante) se agregaron simultáneamente a la placa de microtitulación. Que se recubrió con el anticuerpo de captura purificado por afinidad y seguido de incubación y lavado. A continuación, se añadió sustrato de TMB (3,3 ',5,5'-tetrametilbencidina) en la reacción, HRP catalizó la oxidación de TMB por H2O2Para producir un producto azul (pico máximo de absorción a 655 nm). A continuación, se añadió la solución de parada para terminar la reacción enzimática, dando como resultado un producto de color amarillo (máximo pico de absorción a 450 nm). Los valores de absorbancia a una longitud de onda de 450 nm se correlacionaron positivamente con la concentración del análogo de tripsina en el estándar de calibración y las muestras. La concentración del análogo de tripsina en las muestras se puede calcular usando la curva dosis-respuesta.






Introducción-SHENTEK®Kit ELISA de tripsina analógica

ComponentesCondición de envíoTamaño de la unidadMétodo de detección
Estándar de calibración de tripsina-analógica2-8 ℃96 pruebasSándwich ELISA
Tiras de microtiter antitripsina analógicas
Diluyente
Concentrado de tampón de lavado (10 ×)
Antitripsina-analógico: HRP (100 ×)
Sustrato TMB
Detener la solución
Película de sellado






Especificación-SHENTEK®Kit ELISA de tripsina analógica

Linealidad y rango0,16-10,24 ng/mL, R2> 0.990
ExactitudTasa de recuperación = 94.0%-99.1%
LLOQ0,16 ng/ml
ULOQ10,24 ng/ml
Límite de detección0,0319 ng/ml
Repetibilidad3.6%-4.4% (CV≤ 20%)
EspecificidadNo hay reactividad cruzada con análogos de proteínas comúnmente (e.g., tripsina humana recombinante, tripsina bovina recombinante y tripsina porcina recombinante) y líneas celulares comunes de ingeniería (e.g., MDCK, CHO, Vero, HEK293, E.coli, P.pastoris y células Sf9)
RobustezIncubar a 25 ℃ ± 5 ℃, CV≤ 20%
La idoneidad del instrumento no se limita a Thermo Multiskan FC, Bio-Tek Synergy2






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