Este kit utiliza un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas en fase sólida (ELISA) con una técnica sándwich de doble anticuerpo para detectar E residual. coli (cepas de expresión de proteínas) proteínas de la célula huésped (HCP) en las muestras. Se emplearon anticuerpos policlonales específicos para E.coli (cepas de expresión de proteínas) HCP en el ensayo para capturar cualquier HCP restante en las muestras. Tanto el Estándar de Calibración como las muestras de ensayo se añadieron simultáneamente a la placa de microtitulación recubierta con anticuerpo de captura purificado por afinidad, y seguido de incubación y lavado. El anticuerpo biotinilado se añadió a la placa de microtitulación para unirse a los HCP, después se hizo reaccionar con estreptavidina marcada con HRP (peroxidasa de rábano picante). Se añadió sustrato de TMB (3,3 ',5,5'-tetrametilbencidina) en la reacción, HRP catalizó la oxidación de TMB por H2O2Para producir un producto de color azul (pico máximo de absorción a 655 nm). A continuación, se añadió la solución de parada para terminar la reacción enzimática, dando como resultado un producto de color amarillo (máximo pico de absorción a 450 nm). Los valores de absorbancia a 450 nm de longitud de onda se correlacionaron positivamente con la concentración de HCP en el estándar de calibración y las muestras. La concentración de HCP en la muestra se puede calcular usando la curva dosis-respuesta.
| Componentes | Condición de envío | Tamaño de la unidad | Método de detección |
| Estándar de calibración de HCP-E E.coli | 2-8 ℃ | 96 pruebas | Sándwich ELISA |
| Anti-E.coli HCP-E tiras de microtitulación | |||
| Solución de reconstitución | |||
| Diluyente | |||
| Concentrado de tampón de lavado (10 ×) | |||
| Anti-E.coli HCP-E: Conjugado biotinilado (100 ×) | |||
| Streptavidin-HRP (100 ×) | |||
| Sustrato TMB | |||
| Detener la solución | |||
| Película de sellado |
| Linealidad y rango | 1-243 ng/mL, R²>0.990 |
| Exactitud | Tasa de recuperación = 87.1%-108.3% |
| LLOQ | 1,5 ng/ml |
| LOD | 0,0113 ng/ml |
| Repetibilidad | 3.5%-4.9% (CV≤ 20%) |
| Cobertura de anticuerpos (IMBS-2D) | 70.6%-100% |
| Cobertura de anticuerpos (IMBS-LC/MS) | 88.8% |
| Especificidad | No hay reactividad cruzada con CHO, Vero, HEK293T, HCP polimorfa Hansenula |
| Robustez | Incubar a 25 ± 3 ℃, CV≤ 20% |
| La idoneidad del instrumento no se limita a Thermo Multiskan FC, Bio-Tek Synergy2 |
SHENTEK®Kit de preparación de muestras de ADN de células huésped residual
SHENTEK®Kit de cuantificación de ADN de E. coli residual
SHENTEK®E.coli (K-12 y lisis alcalina) HCP ELISA Kit
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