Kit ELISA CHO HCP (ELISA en un solo paso)

El kit ELISA de proteína de célula huésped CHO utiliza un cultivo de células CHO (K1 & S) en lotes de alimentación para producir HCP, que se utilizan para la generación de anticuerpos específicos a través de la inmunización de ovejas. El kit ELISA de proteínas de células huésped CHO emplea un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas en fase sólida (ELISA) con una técnica sándwich de doble anticuerpo para detectar proteínas residuales de células huésped CHO (HCP) en la muestra. El anticuerpo policlonal específico para las HCP de CHO se empleó en el ensayo para capturar cualquier HCP restante en la muestra. Tanto los estándares de calibración (o muestra de prueba) como el anticuerpo anti-CHO HCP marcado con HRP (Peroxidasa de rábano picante) se agregaron simultáneamente a la placa de microtitulación. Que se recubrió con el anticuerpo de captura purificado por afinidad y seguido de incubación y lavado. Entonces TMB (3,3 ',5,5'-tetrametilbencidina) sustrato añadido para la reacción, HRP catalizó la oxidación de TMB porH₂O₂Para producir un producto azul (pico máximo de absorción a 655 nm). A continuación, se añade la solución de parada para terminar la reacción enzimática, dando como resultado un producto de color amarillo (máximo pico de absorción a 450 nm). Los valores de absorbancia a 450 nm de longitud de onda se correlacionaron positivamente con la concentración de HCP en los estándares de calibración y la muestra. La concentración de CHO HCP en la muestra se puede calcular usando la curva dosis-respuesta.