El kit ELISA Sf9 HCP se basa en el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas en fase sólida (ELISA) con una técnica sándwich de doble anticuerpo para detectar proteínas residuales de células huésped (HCP) de células Sf9. Se empleó un anticuerpo policlonal de oveja específico para HCP de Sf9 en el ensayo para capturar cualquier HCP restante en la muestra. La cobertura de anticuerpos se evalúa mediante el método actual de la corriente principal. Tanto los estándares de calibración (o muestra de prueba) como la HRP (peroxidasa de rábano picante) marcados con anti-Sf9 anticuerpo HCP se añadieron simultáneamente a la placa de microtitulación recubierta con el anticuerpo de captura purificado por afinidad. y seguido de incubación y lavado. A continuación, se añadió sustrato de TMB (3,3 ',5,5'-tetrametilbencidina) en la reacción, HRP catalizó la oxidación de TMB porH2O2Para producir un producto de color azul (pico máximo de absorción a 655 nm). A continuación, se añadió la solución de parada para terminar la reacción enzimática, dando como resultado un producto de color amarillo (máximo pico de absorción a 450 nm). Los valores de absorbancia a 450 nm de longitud de onda se correlacionaron positivamente con la concentración de HCP en el estándar de calibración y las muestras. La concentración de HCP en las muestras se puede calcular usando una curva dosis-respuesta.
| Componentes | Condición de envío | Tamaño de la unidad | Método de detección |
| Estándar de calibración Sf9 HCP | 2-8 ℃ | 96 pruebas | Sándwich ELISA |
| Anti-Sf9 tiras de microtitulación HCP | |||
| Solución de reconstitución | |||
| Diluyente | |||
| Concentrado de tampón de lavado (10 ×) | |||
| Anti-Sf9:HRP (100 ×) | |||
| Sustrato TMB | |||
| Detener la solución | |||
| Película de sellado |
| Linealidad y rango | 3-243 ng/mL, R2> 0.990 |
| Exactitud | Tasa de recuperación = 88.9%-100.6% |
| LLOQ | 3 ng/mL |
| ULOQ | 243 ng/ml |
| LOD | 0,9 ng/ml |
| Precisión | 3.2%-7.7% (CV≤ 20%) |
| Cobertura de anticuerpos (IMBS-2D) | 70.4%-90.6% |
| Cobertura de anticuerpos (IMBS-LC/MS) | 91.2% (péptido único ≥ 2) |
| Especificidad | Sin reactividad cruzada con MDCK, Vero, HEK293T, CHO. Cepas de E.coli y P.pastoris. |
| Robustez | Incubar a 25 ± 5 ℃, CV≤ 20% |
| La idoneidad del instrumento no se limita a los lectores de microplacas Thermo Multiskan FC, MD Spectra Max ABS |
SHENTEK®Kit de preparación de muestras de ADN de células huésped residual
SHENTEK®Kit de cuantificación de ADN residual Sf9 y AcNPV
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