Este kit utiliza un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas en fase sólida (ELISA) con una técnica sándwich de doble anticuerpo para detectar proteínas residuales de células huésped (HCP) de células HEK293 en la muestra. Se empleó un anticuerpo policlonal específico para HEK293 HCP en el ensayo para capturar cualquier HCP restante en la muestra. Tanto los estándares de calibración (o muestra de prueba) como el anticuerpo HCP anti-HEK293 marcado con HRP (peroxidasa de rábano picante) se agregaron simultáneamente a la placa de microtitulación. Que se recubrió con el anticuerpo de captura purificado por afinidad y seguido de incubación y lavado. A continuación, se añadió sustrato de TMB (3,3 ',5,5'-tetrametilbencidina) en la reacción, HRP catalizó la oxidación de TMB porH2O2Para producir un producto azul (pico máximo de absorción a 655 nm). A continuación, se añadió la solución de parada para terminar la reacción enzimática, dando como resultado un producto de color amarillo (máximo pico de absorción a 450nm). Los valores de absorbancia en la longitud de onda de 450 nm se correlacionaron positivamente con la concentración de HCP en el estándar de calibración y la muestra. La concentración de HCP en la muestra se puede calcular usando la curva dosis-respuesta.
| Componentes | Condición de envío | Tamaño de la unidad | Método de detección |
| Estándar de calibración HEK293 HCP | 2-8 ℃ | 96 pruebas | Sándwich ELISA |
| Anti-HEK293 tiras de microtitulación HCP | |||
| Solución de reconstitución | |||
| Diluyente | |||
| Concentrado de tampón de lavado (10 ×) | |||
| Anti-HEK293:HRP (100 ×) | |||
| Sustrato TMB | |||
| Detener la solución | |||
| Película de sellado |
| Linealidad y rango | 6-540 ng/mL, R2> 0.990 |
| Exactitud | Tasa de recuperación = 96.7%-102.9% |
| LLOQ | 6 ng/mL |
| LOD | 1 ng/mL |
| Precisión | 2.4%-3.7% (CV≤ 20%) |
| Cobertura de anticuerpos (IMBS-2D) | 67.1%-82.8% |
| Cobertura de anticuerpos (IMBS-LC/MS) | 79.7% |
| Especificidad | No hay reactividad cruzada con P.pastoris y célula Sf9. |
| Robustez | Incubar a 25 ± 3 ℃, CV≤ 20% |
| Velocidad de incubación: 500-600 rpm | |
| La idoneidad del instrumento no se limita a los lectores de microplacas Thermo Multiskan FC, MD Spectra Max ABS |
SHENTEK®Kit de preparación de muestras de ADN de células huésped residual
SHENTEK®Kit de cuantificación de ADN residual HEK293 (3G)
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