Este kit es adecuado para la cuantificación de endonucleasa no específica (SMNE) en el proceso de purificación de bioproductos. Puede detectar endonucleasas modificadas genéticamente de Serratia marcescens, como la Benzonasa®Endonucleasa.
Este SHENTEK®El kit ELISA de endonucleasa no específica (SME) se basa en el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas en fase sólida (ELISA) con una técnica sándwich de doble anticuerpo para detectar endonucleasa inespecífica residual (SMNE). Se empleó un anticuerpo policlonal de oveja específico para SME en el ensayo para capturar cualquier impureza SME restante en la muestra. Tanto los estándares de calibración como las muestras de prueba se añadieron simultáneamente a la placa de microtitulación recubierta con anticuerpo de captura purificado por afinidad y seguido de incubación y lavado. El anticuerpo biotinilado se añadió a la placa de microtitulación para unirse al SME y después reaccionó con estreptavidina marcada con HRP (Peroxidasa de rábano picante). Se añadió sustrato de TMB (3,3 ',5,5'-tetrametilbencidina) en la reacción, HRP catalizó la oxidación de TMB por H2O2Para producir un producto azul (pico máximo de absorción a 655 nm). A continuación, se añadió la solución de parada para terminar la reacción enzimática, dando como resultado un producto de color amarillo (máximo pico de absorción a 450 nm). Los valores de absorbancia a una longitud de onda de 450 nm se correlacionaron positivamente con la concentración de SMNE en el estándar de calibración y la muestra. La concentración de SMNE en la muestra se puede calcular usando una curva de dosis-respuesta.
| Componentes | Condición de envío | Tamaño de la unidad | Método de detección |
| Estándar de calibración SMNE | 2-8 ℃ | 96 pruebas | Sándwich ELISA |
| Tiras de microtitulación anti-SMNE | |||
| Diluyente SMNE | |||
| Concentrado de tampón de lavado (10 ×) | |||
| Anti-SMNE: Conjugado biotinilado (100 ×) | |||
| Streptavidin-HRP (100 ×) | |||
| Sustrato TMB | |||
| Detener la solución | |||
| Película de sellado |
| Linealidad y rango | 0,25-25 ng/mL, R2> 0.990 |
| Exactitud | Tasa de recuperación = 96.9%-109.9% |
| LLOQ | 0,25 ng/ml |
| ULOQ | 25 ng/mL |
| Límite de detección | 0,0736 ng/ml |
| Repetibilidad | 3.4%-7.9% (CV≤ 20%) |
| Especificidad | No hay reactividad cruzada con análogos de proteínas comúnmente (e. G. BSA, RNasa A, DNasa I), HCP (e. G. CHO, 293T, E.coli, Vero) y ADN genómico (e. G. Hansenula polymorpha, 293T, E.coli). |
| Robustez | Incubar a 25 ℃ ± 5 ℃, CV≤ 20% |
| La idoneidad del instrumento no se limita a Thermo Multiskan FC, Bio-Tek Synergy2 |
SHENTEK®Kit de preparación de muestras de ADN de células huésped residual
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