Este kit es adecuado para la detección cuantitativa de DNasa I residual en el proceso de fabricación de productos biológicos como vacunas/medicamentos de ARNm.
El SHENTEK®El kit ELISA de desoxirribonucleasa, (ADNasa, por sus siglas en inglés) se basa en el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas en fase sólida (ELISA) con una técnica sándwich de doble anticuerpo para detectar la desoxirribonucleasa (DNasa, por sus siglas en inglés). En el ensayo se empleó un anticuerpo policlonal de oveja específico de DNasa, para capturar cualquier DNasa restante tiene impurezas en la muestra. Tanto los patrones de calibración como las muestras de ensayo se añadieron simultáneamente a la placa de microtitulación recubierta con el anticuerpo de captura purificado por afinidad, y seguido de incubación y lavado. El anticuerpo biotinilado se añadió a la placa de microtitulación para unirse a la DNasa y después se hizo reaccionar con HRP marcado con estreptavidina (peroxidasa de rábano picante). Se añadió sustrato de TMB (3,3 ',5,5'-tetrametilbencidina) en la reacción, HRP catalizó la oxidación de TMB por H2O2Para producir un producto de color azul (pico máximo de absorción a 655 nm). A continuación, se añadió la solución de parada para terminar la reacción enzimática, dando como resultado un producto de color amarillo (máximo pico de absorción a 450 nm). Los valores de absorbancia a 450 nm de longitud de onda se correlacionaron positivamente con la concentración de DNasa en el estándar de calibración y las muestras. La concentración de DNasa Ⅰ en las muestras se puede calcular usando una curva de dosis-respuesta.
| Componentes | Condición de envío | Tamaño de la unidad | Método de detección |
| DNase, estándar de calibración | 2-8 ℃ | 96 pruebas | Sándwich ELISA |
| Anti-dnasa, tiras de microtitulación | |||
| Diluyente | |||
| Concentrado de tampón de lavado (10 ×) | |||
| Anti-dnasa Ⅰ: Conjugado biotinilado (100 ×) | |||
| Streptavidin-HRP (100 ×) | |||
| Sustrato TMB | |||
| Detener la solución | |||
| Película de sellado |
| Linealidad y rango | 0,5-32 ng/mL, R2> 0.990 |
| Exactitud | Tasa de recuperación = 89.2%-109.4% |
| LLOQ | 0,5 ng/ml |
| ULOQ | 32 ng/mL |
| Precisión | 0,1 ng/ml |
| Especificidad | Sin reactividad cruzada con Vero, HEK293T, CHO, E.coli, P.pastoris y SF9HCP. |
| Robustez | Incubar a 25 ± 3 ℃, CV≤ 20% |
| La idoneidad del instrumento no se limita a MD Spectra Max ABS y Thermo Multiskan FC |
SHENTEK®Kit de preparación de muestras de ADN de células huésped residual
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