Este kit se basa en el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas en fase sólida (ELISA) con una técnica sándwich de doble anticuerpo para detectar proteínas residuales de células huésped (HCP) de células MDCK. Se empleó un anticuerpo policlonal de oveja específico para las MDCK HCP en el ensayo para capturar cualquier HCP restante en la muestra. La cobertura de anticuerpos se evalúa mediante el método actual de la corriente principal. Tanto los estándares de calibración (o muestra de prueba) como la HRP (peroxidasa de rábano picante) marcados con anticuerpo HCP anti-MDCK se añadieron simultáneamente a la placa de microtitulación recubierta con el anticuerpo de captura purificado por afinidad. y seguido de incubación y lavado. A continuación, se añadió sustrato de TMB (3,3 ',5,5'-tetrametilbencidina) en la reacción, HRP catalizó la oxidación de TMB porH2O2Para producir un producto azul (pico máximo de absorción a 655 nm). A continuación, se añadió la solución de parada para terminar la reacción enzimática, dando como resultado un producto de color amarillo (máximo pico de absorción a 450 nm). Los valores de absorbancia a 450 nm de longitud de onda se correlacionaron positivamente con la concentración de HCP en el estándar de calibración y las muestras. La concentración de HCP en las muestras se puede calcular usando una curva dosis-respuesta.
| Componentes | Condición de envío | Tamaño de la unidad | Método de detección |
| Estándar de calibración MDCK HCP | 2-8 ℃ | 96 pruebas | Sándwich ELISA |
| Tiras de microtitulación Anti-MDCK HCP | |||
| Solución de reconstitución | |||
| Diluyente | |||
| Concentrado de tampón de lavado (10 ×) | |||
| Anti-MDCK: HRP (100 ×) | |||
| Sustrato TMB | |||
| Detener la solución | |||
| Película de sellado |
| Linealidad y rango | 2-200 ng/mL, R2> 0.990 |
| Exactitud | Tasa de recuperación = 95.8%-110.8% |
| LLOQ | 2 ng/mL |
| ULOQ | 200 ng/ml |
| LOD | 2 ng/mL |
| Precisión | 1.6%-5.5% (CV≤ 20%) |
| Cobertura de anticuerpos (IMBS-2D) | 74.2%-89.7% |
| Cobertura de anticuerpos (IMBS-LC/MS) | 70.1% |
| Especificidad | Sin reactividad cruzada conE.coli, P.pastorisY células Sf9. |
| Robustez | Incubar a 25 ± 5 ℃, CV≤ 20% |
SHENTEK®Kit de preparación de muestras de ADN de células huésped residual
SHENTEK®Kit de cuantificación de ADN MDCK residual
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